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革蘭氏染色與細(xì)菌抗酸染色技術(shù)操作技巧分享
點(diǎn)擊次數(shù):769 更新時(shí)間:2023-11-01

  蘭氏染色和抗酸染色都屬于細(xì)菌形態(tài)學(xué)檢查法,提到革蘭氏染色大家肯定都非常熟悉,但是說(shuō)到抗酸染色你不一定了解。今天我們進(jìn)入細(xì)菌的世界,聊一聊細(xì)菌界的這兩大染色法:

  革蘭氏染色(Gram stain)

  用途:由丹麥病理學(xué)家Christain Gram于1884年創(chuàng)立,直到現(xiàn)今,革蘭氏染色法仍是細(xì)菌學(xué)中廣泛使用的一種鑒別染色法。通過(guò)革蘭氏染色,可將細(xì)菌鑒別為革蘭陽(yáng)性菌(G+)和革蘭陰性菌(G-)兩大類(lèi)。

  原理:細(xì)菌經(jīng)龍膽紫初染和碘液媒染后,在細(xì)胞壁內(nèi)形成了不溶于水的龍膽紫與碘的復(fù)合物,革蘭氏陽(yáng)性菌(G+)由于其細(xì)胞壁較厚、肽聚糖網(wǎng)層次較多且交聯(lián)致密,故遇乙醇脫色處理時(shí),因失水反而使網(wǎng)孔縮小,再加上它不含類(lèi)脂,故乙醇處理不會(huì)出現(xiàn)縫隙,因此,能把復(fù)合物牢牢留在壁內(nèi),使其仍呈藍(lán)紫色;而革蘭氏陰性菌(G-)因其細(xì)胞壁薄、外膜層類(lèi)脂含量高、肽聚糖層薄且交聯(lián)度差,在遇脫色劑后,以類(lèi)脂為主的外膜迅速溶解,薄而松散的肽聚糖網(wǎng)不能阻擋復(fù)合物的溶出,因此通過(guò)乙醇脫色后仍呈無(wú)色,再經(jīng)紅色染料復(fù)染,就使革蘭氏陰性菌呈紅色。

  染色結(jié)果:

  革蘭陽(yáng)性菌(G+):藍(lán)色

  革蘭陽(yáng)性菌(G+):紅色

  其他組織:黃色

  細(xì)胞核:紅色

  抗酸染色(Acid Fast Bacteria (AFB) Stain)

  用途: 由埃利希(F.Ehrlich)1882年shou創(chuàng),并經(jīng)F.齊爾(Ziehl)改進(jìn)而創(chuàng)造出的細(xì)菌染色法,用于細(xì)菌標(biāo)本涂片或菌落涂片的染色,目前常用于對(duì)分枝桿菌屬進(jìn)行初步鑒別。

  原理: 分枝桿菌的細(xì)胞壁內(nèi)含有大量的脂質(zhì)(主要成分為分枝菌酸),包圍在肽聚糖的外面,具有抗酸性,染色時(shí)與石炭酸復(fù)紅結(jié)合牢固,能抵抗酸性乙醇的脫色作用,,因此抗酸菌能保持復(fù)紅的顏色,達(dá)到染色目的。未脫色細(xì)菌呈紅色為抗酸性細(xì)菌,脫色經(jīng)復(fù)染呈藍(lán)綠色的細(xì)菌為非抗酸性細(xì)菌。

  染色結(jié)果:

  抗酸菌組織:紅色

  其他細(xì)菌及背景:淺綠色

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